បដាក្បាលតែមួយ

អង់ស៊ីមជាច្រើនដែលប្រើជាទូទៅក្នុងការពិសោធន៍ PCR

ប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់ Polymerase អក្សរកាត់ថាPCRជាភាសាអង់គ្លេស គឺជាបច្ចេកទេសជីវវិទ្យាម៉ូលេគុលដែលប្រើដើម្បីពង្រីកបំណែក DNA ជាក់លាក់។វាអាចត្រូវបានចាត់ទុកថាជាការចម្លង DNA ពិសេសនៅខាងក្រៅរាងកាយ ដែលអាចបង្កើនចំនួន DNA តិចតួចបំផុត។ក្នុងអំឡុងពេលទាំងមូលPCRដំណើរការប្រតិកម្ម សារធាតុមួយប្រភេទដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់ - អង់ស៊ីម។

1. តាក DNA

នៅក្នុងការពិសោធន៍នៅដើមដំបូងនៃPCRអ្នកវិទ្យាសាស្ត្របានប្រើ Escherichia coli DNA polymerase I ប៉ុន្តែមានបញ្ហាជាមួយអង់ស៊ីមនេះ៖ វាត្រូវការបំពេញអង់ស៊ីមថ្មីរាល់ពេលដែលវដ្តត្រូវបានអនុវត្ត ដែលធ្វើឱ្យជំហានប្រតិបត្តិការមានភាពស្មុគស្មាញបន្តិច ហើយវាពិបាកក្នុងការពង្រីកដោយស្វ័យប្រវត្តិយ៉ាងពេញលេញ។បញ្ហានេះត្រូវបានដោះស្រាយបន្ទាប់ពីអ្នកវិទ្យាសាស្ត្របានញែក Taq DNA polymerase ដោយចៃដន្យពី Thermus aquaticus ក្នុងឆ្នាំ 1988។ ចាប់តាំងពីពេលនោះមក ការពង្រីក DNA ដោយស្វ័យប្រវត្តិបានក្លាយជាការពិត។ការរកឃើញអង់ស៊ីមនេះក៏បង្កើតដែរ។PCRបច្ចេកវិទ្យា ជាបច្ចេកវិទ្យាងាយស្រួល ជាក់ស្តែង និងជាសកល។បច្ចុប្បន្ននេះ Taq DNA polymerase គឺជាវត្ថុធាតុ polymerase ទូទៅបំផុតនៅក្នុងឧបករណ៍ DNA ។

2. PfuDNA

ដូចដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ Taq DNase មានកំហុសដ៏ធំមួយ ដូច្នេះអ្នកវិទ្យាសាស្ត្របានកែប្រែ Taq DNA polymerase ក្នុងកម្រិតជាក់លាក់មួយ ដើម្បីជៀសវាងការពង្រីកមិនជាក់លាក់ដោយសារការមិនស៊ីគ្នា ដែលនាំឱ្យលទ្ធផលតេស្តមិនត្រឹមត្រូវ។ប៉ុន្តែការកែប្រែនៃ Taq DNA polymerase អាចរារាំងសកម្មភាពរបស់ DNA polymerase នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់។PfuDNA polymerase អាចបង្កើតបានជាគុណវិបត្តិខាងលើនៃ Taq DNA polymerase ដូច្នេះប្រតិកម្ម PCR អាចត្រូវបានអនុវត្តជាធម្មតា ហើយអត្រាជោគជ័យនៃការពង្រីកហ្សែនគោលដៅអាចត្រូវបានកែលម្អយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព។

3. Reverse Transcriptase

Reverse transcriptase ត្រូវបានរកឃើញនៅឆ្នាំ 1970 ។ អង់ស៊ីមនេះប្រើ RNA ជាគំរូ dNTP ជាស្រទាប់ខាងក្រោម ធ្វើតាមគោលការណ៍នៃការផ្គូផ្គងមូលដ្ឋាន និងសំយោគ DNA ខ្សែតែមួយដែលបំពេញបន្ថែមទៅនឹងគំរូ RNA ក្នុងទិសដៅ 5′-3′ ។Reverse transcriptase គឺពឹងផ្អែកជាចម្បងលើសកម្មភាព DNA polymerase ពីគំរូ DNA ឬ RNA ដូច្នេះហើយមិនមានសកម្មភាព exonuclease 3′-5′ ទេ។ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយវាមានសកម្មភាព RNase H ដែលកំណត់រយៈពេលសំយោគនៃ transcriptase បញ្ច្រាសក្នុងកម្រិតជាក់លាក់មួយ។ដោយសារតែភាពស្មោះត្រង់ទាប និងស្ថេរភាពនៃ transcriptase បញ្ច្រាសព្រៃ អ្នកវិទ្យាសាស្ត្រក៏បានកែប្រែវាផងដែរ។

PCR管系列

សម្រាប់PCRការពិសោធន៍ សម្ភារៈប្រើប្រាស់សំខាន់ៗគឺ៖ បំពង់ PCR បុគ្គល, បំពង់ PCR 4/8-strip, ចាន PCR ។

របស់ LabioPCR សម្ភារៈប្រើប្រាស់មានដូចខាងក្រោមគុណសម្បត្តិ:

ចាន PCR: ភាពឆបគ្នានៃម៉ាស៊ីនកំដៅធំទូលាយ;កម្រិតពណ៌ខ្ពស់ ងាយស្រួលកំណត់អត្តសញ្ញាណ;ការឆ្លុះបញ្ចាំង fluorescence ល្អ; ល្អ។ការផ្ទេរកំដៅ;វិញ្ញាបនបត្រ DNase, RNase, DNA, PCR inhibitors និងបានសាកល្បងដោយគ្មាន pyrogen ។

បំពង់ PCR បុគ្គល: ធន់នឹងការហួត; ល្អ។ការផ្ទេរកំដៅ;ភាពច្បាស់លាស់អុបទិកល្អឥតខ្ចោះ; បញ្ជាក់ DNase, RNase, DNA, PCR inhibitors និងបានសាកល្បងដោយគ្មាន pyrogen ។

បំពង់ PCR 4/8 បន្ទះ: ជញ្ជាំងស្តើងបំផុត ភាពច្បាស់លាស់ខ្ពស់ ការឆ្លុះបញ្ចាំងពន្លឺល្អ;អាចប្រើប្រាស់ក្នុងឧស្សាហកម្មឱសថ ឧស្សាហកម្មចំណីអាហារ និងជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល គុណភាពខ្ពស់ សម្ភារៈ PP ព្រហ្មចារី វិញ្ញាបនបត្រ DNase, RNase, DNA, PCR inhibitors និងសាកល្បងដោយគ្មានសារធាតុ pyrogen ។

 

 


ពេលវេលាផ្សាយ៖ មិថុនា-០៩-២០២៣